PS-304 不锈钢开口直壁容器

蛔虫卵测定、沉淀集卵法

容量：10L带刻度

配套 1ML 网格 浮游生物计数框 和 5ML S型 浮游生物计数框

沉淀集卵法主要通过样品浓缩，杂质分离，镜检计数等环节对水中蠕虫卵进行测定，用60目筛网过滤去除样品中较大的杂质，利用回传卵比重大于水和易于沉淀的特定特性过夜沉淀浓缩水样，用虹吸的方法弃去上清液，用表面活性剂吐温80作为残液及沉淀转移时的清洗剂，进一步离心浓缩转移的剩余物，收集到的浓缩物用乙酸-乙酸钠缓冲液混匀控制溶液PH值，获得最佳亲水-亲脂平衡，加入乙酸乙酯吸收水中的脂肪类杂质使蛔虫卵更易下沉，再次离心浓缩样品并弃去上部脂肪杂质层及缓冲液层，获得的含卵沉淀层用饱和硝酸钠溶液混匀，于计数框中静置漂浮后镜检，即可测得水样中蛔虫卵的数量。

不锈钢开口直壁容器10L（蛔虫卵测定）蛔虫卵测定 沉淀集卵法：

蛔虫卵分受精卵和未受精卵。受精卵呈宽椭圆形。蛔虫卵一旦进入人体，在它发育到成熟的整个过程中都会给人体造成危害。蛔虫卵在土壤、肥料、人体等自然界广泛存在！防止粪便污染环境是切断蛔虫传播途径的重要措施。

　　蛔虫卵死亡率直接影响肥料的效果，可采用五格三池贮粪法，使粪便中虫卵大部分沉降在池底。由于粪水中游离氨的作用和厌氧发酵，虫卵可被杀灭，同时也会增加肥效。在用于粪做肥料的地区，可采用泥封堆肥法，三天后，粪堆内温度可上升至52℃或更高，可以杀死蛔虫卵。

　　那么蛔虫卵死亡率又是如何测定的呢？依据GB/T 19524.2—2004如下：将碱性溶液与肥料样品充分混合，分离蛔虫卵，然后用密度较蛔虫卵密度大的溶液为漂浮液，使蛔虫卵漂浮在溶液的表面，从而收集检验。

　　1、蛔虫卵分离

　　称取5.0～10.0 g样品（颗粒较大的样品应先进行研磨），放于容量为50 mL离心管中，注入NaOH溶液25～30 mL,另加玻璃珠约10粒，用橡皮塞塞紧管口，放置在振荡器上，静置30 min后，以200～300 r/ min频率振荡10～15 min。振荡完毕，取下离心管上的橡皮塞，用玻璃棒将离心管中的样品充分搅匀，再次用橡皮塞塞紧管口，静置15～30 min 后，振荡10～15 min。

　　2、离心沉淀

　　从振荡器上取下离心管，拔掉橡皮塞，用滴管吸取蒸馏水，将附着于橡皮塞上和管口内壁的样品冲入管中，以2000～2500 r/ min速度离心3～5 min后，弃去上清液。然后加适量蒸馏水，并用玻璃棒将沉淀物搅起，按上述方法重复洗涤三次。

　　3、 离心漂浮

　　往离心管中加入少量饱和 NaNO3 溶液，用玻璃棒将沉淀物搅成糊状后，再徐徐添加饱和 NaNO3 溶液，随加随搅，直加到离管口约1 cm为止，用饱和 NaNO3 溶液冲洗玻璃棒，洗液并入离心管中，以2000～2500 r/ min速度离心3～5 min。

　　用金属丝圈不断将离心管表层液膜移于盛有半杯蒸馏水的烧杯中，约30次后，适当增加一些饱和NaNO3 溶液于离心管中，再次搅拌、离心及移置液膜，如此反复操作３～４次，直到液膜涂片观察不到蛔虫卵为止。

　　4、抽滤镜检

　　将烧杯中混合悬液，通过覆以微孔火棉胶滤膜的高尔特曼氏漏斗抽滤。若混合悬液的浑浊度大，可更换滤膜。

　　抽滤完毕，用弯头镊子将滤膜从漏斗的滤台上小心取下，置于载玻片上，滴加二、三滴甘油溶液，于低倍显微镜下对整张滤膜进行观察和蛔虫卵计数。当观察有蛔虫卵时，将含有蛔虫卵的滤膜进行培养。

　　5 、培养

　　在培养皿的底部平铺一层厚约1 cm 的脱脂棉，脱脂棉上铺一张直径与培养皿相适的普通滤纸。为防止霉菌和原生动物的繁殖，可加入甲醛溶液或甲醛生理盐水，以浸透滤纸和脱脂棉为宜。

　　将含蛔虫卵的滤膜平铺在滤纸上，培养皿加盖后置于恒温培养箱中，在28 ℃～30 ℃ 条件下培养，培养过程中经常滴加蒸馏水或甲醛溶液，使滤膜保持潮湿状态。

　　6、 镜检

　　培养10～15 d ，自培养皿中取出滤膜置于载玻片上，滴加甘油溶液，使其透明后，在低倍镜下查找蛔虫卵，然后在高倍镜下根据形态，鉴定卵的死活，并加以计数。镜检时若感觉视野的亮度和膜的透明度不够，可在载玻片上滴一滴蒸馏水，用盖玻片从滤膜上刮下少许含卵滤渣，与水混合均匀，盖上盖玻片进行镜检。

　　7、 判定

　　凡含有幼虫的，都认为是活卵，未孵化或单细胞的都判为死卵。

　　8、 结果计算

　　式中：

　　K —蛔虫卵死亡率（%）

　　N1—镜检总卵数

　　N2—培养后镜检活卵数